TSA多色免疫荧光
酪酰胺信号放大(TSA)技术是一种以辣根过氧化酶(HRP)为标记对目标蛋白进行检测的酶学方法。与传统的免疫组化的DAB显色方法类似,TSA技术同样使用多聚HRP的二抗,并包含相应的"显色"步骤。在反应体系中,HRP催化加入酪胺荧光素底物,产生活化荧光底物。此活化底物可以与抗原上的酪氨酸等残基发生共价结合,在样品中形成稳定的共价结合酪胺荧光素本技术被广泛应用于TSA多色免疫荧光实验外包项目。
技术原理
酪酰胺信号放大(TSA)技术是一种利用辣根过氧化酶(HRP)对目标蛋白进行标记的酶学检测方法。类似于常规的免疫组化DAB显色方法,TSA技术同样采用多聚HRP的二抗,并且具有相应的“显色”步骤。在反应体系中,HRP催化加入酪胺荧光素底物,产生活性荧光底物。这种活性底物可以共价结合到抗原上的酪氨酸等残基,从而形成样品上稳定的共价结合酪胺荧光素。接下来,使用热修复法洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP复合物,并重复使用另一种一抗-HRP二抗进行第二轮孵育。在每轮孵育中,都可以更换另一种酪胺荧光素底物,以实现多重标记。
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