Tunel染色
当基因组DNA出现断裂时,末端3'-OH会暴露出来,这些暴露的末端可以被末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)所催化,使得荧光素标记的dUTP (fluorescein-dUTP)与其结合。这个过程可以使用TUNEL(TdT介导的dUTP缺口末端标记)方法来检测。通过荧光显微镜或流式细胞仪,可以轻松地检测出是否出现细胞凋亡。
技术原理
细胞在经历凋亡过程时,会引发某些DNA内切酶的激活,这些酶会切割核小体之间的基因组DNA。对于进行细胞凋亡检测的电泳实验,所提取的DNA显示出一个由180到200个碱基对组成的DNA梯度。当基因组DNA发生分裂时,末端的3'-OH会被一种被称为脱氧核苷酸末端转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化剂加上某种带有荧光素或生物素标签的dUTP。通过荧光显微镜或化学染色方法,我们能够检测到细胞凋亡的情况。
真实实验研究 上百项检测实验 6大实验平台